Thème scientifique: Mitose

C. Breul (lycée C. Vernet - Valence)

On peut , sans difficultés, observer des chromosomes de cellules méristématiques de racines d'oignon .Cette activité présente l'intérêt d'être insérée de manière cohérente dans le chapitre "reproduction et hérédité", puisqu'elle permet d'aboutir à la compréhension du phénomène de mitose, observé par ailleurs de manière complémentaire sur des séquences vidéo .

Niveau d'utilisation: 3ème / 1èreS

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On pourra réserver aux classes de lycée l'observation de chromosomes géants de glandes salivaire de larve de chironome (plus difficilement reliables à ce stade aux objets de connaissance) .

Le carmin , relativement cher pour un budget de collège, doit pouvoir être acheté en commun par plusieurs établissements; il peut probablement aussi être obtenu "au détail" auprès d'un lycée voisin.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Fixation

Les livres recommandent de couper les racines vers 10 heures du matin ou 16 heures pour avoir beaucoup de mitoses.

  • Fixer des racines de 3 à 5 mm de long . Fixateur: - alcool absolu ou à 95% - 3 volumes - acide acétique glacial - 1 volume - préparer le mélange juste avant l'emploi
  • fixer 24 heures à la température du laboratoire
  • mettre au réfrigérateur ( se conserve plusieurs jours à plusieurs semaines )

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Coloration : Carmin acétique

  • Dissoudre 1 à 2 grammes de carmin acétique dans 200 cc d'acide acétique dilué .
  • Chauffer au bain - marie jusqu'à l'obtention d'une ébullition modérée .
  • Maintenir l'ébullition pendant 20 minutes .
  • Filtrer et conserver en flacon jaune à l'obscurité .

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Technique

  1. -Fixation : - 10 cc de fixateur + 10 gouttes de carmin acétique + racines - mettre au réfrigérateur 5 jours avant la coloration et l'étalement
  2. -Coloration : - racines dans 10 cc de carmin acétique - chauffer 2 minutes - laisser refroidir
  3. - Placer les racines sur une lame propre dans du carmin acétique frais après les avoir coupées en deux dans le sens de la longueur .
  4. - Les dilacérer à l'aide d'épingles à insectes . Poser une lamelle puis un papier filtre pour étaler sans écraser .
  5. - Observer au microscope .
  6. - Mettre une lamelle propre et luter pour conservation 8 à 10 jours au réfrigérateur .
Sciences de la Vie et de la Terre - Académie de Grenoble -